大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于qpcr引物设计网站的问题,于是小编就整理了5个相关介绍qpcr引物设计网站的解答,让我们一起看看吧。
qpcr引物是什么?
引物就是为了增幅目的DNA而导入的短小DNA片断,在PCR反应中,新合成的DNA是要接在引物上才能继续按照模版DNA复制.引物的设计因需要增幅的序列而不同.
1、待测菌体.试管或培养皿都可以,但必须是纯粹的待测菌体,不能含有其他的微生物.
2、提纯的DNA.如果1有致病性或传染性,那么楼主就得自己提纯DNA再交给测序公司.DNA纯度要求可以做PCR.
primerbank里面的引物靠谱吗?
primerbank靠谱吗?
它是靠谱的,PrimerBank 是一个 PCR 引物的公共数据库。其引物可以用于 PCR 或 qPCR,共包含超过 306 800 个引物,涵盖大多数已知的人和小鼠基因。
qpcr引物gc含量多少合适?
QPCR引物的GC含量应控制在**40%~60%**之间,过高或过低都不利于引发反应。其中,G+C含量在45-55%为最佳。
此外,引物长度一般在17-25碱基之间,上下游引物不能相差太大。引物二聚体和自二聚体应尽量避免,发卡结构如果不可避免,使ΔG<4.5kJ/mol。3′端不可修饰,而且要避开AT、GC rich的区域,避开T/C、A/G连续结构(2-3个)。
以上内容仅供参考,建议咨询专业人士获取更准确的信息。
pcr引物设计四大原则?
pcr引物设计应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
引物放4度冰箱能保存多久?
引物放在4度冰箱中可以保存几个月至一年不等,具体时间会受到多种因素的影响,例如引物的浓度、保存条件和冰箱中的温度波动等。一般来说,如果引物保存在深冷冻库中,可以延长其保存时间。建议使用引物前做好检测和检查,确保引物没有受到污染或退化,以确保实验的可靠性和准确性。
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